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核酸檢測具體怎么檢測

核酸檢測是怎樣檢測的
眾所周知,新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是一種烈性呼吸道傳染病,其病原體為新型冠狀病毒 。若想證實已出現(xiàn)的感染癥狀是由本病毒所引起,最準確的方法是從患者體內分離出活病毒,并進行病毒培養(yǎng) 。
然而,此方法并不適合大面積應用,在此次疑似病例的確診工作中,也并不適用 。這是因為病毒培養(yǎng)所需時間較長,需要的場所條件也很高(P3級實驗室),時效性遠遠跟不上臨床需要 。
而核酸檢測作為病原學的檢測手段之一,效率很高,一般情況下幾個小時就可以知道結果 。因此,在此次疫情中,臨床上取得病原學證據(jù)的主要方式并不是病毒培養(yǎng),而是核酸檢測 。
核酸是遺傳信息載體,是對DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)的統(tǒng)稱 。病毒則主要由遺傳物質和蛋白質組成 。而新型冠狀病毒正是一種RNA病毒,其遺傳物質是單鏈RNA 。核酸檢測的原理,正是檢測在被測者的咽拭子等樣本中,是否存在病毒的RNA 。如果存在,說明被病毒感染 。那么,我們是否已經(jīng)獲悉了病毒的RNA呢?
在武漢疫情初期,中國疾病預防控制中心應用宏基因組學技術,在短時間內完成該病毒的鑒定,并獲取了全基因組序列 。在病毒全基因組序列公布后,實時熒光逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)試劑被快速研發(fā) 。
隨后,核酸檢測試劑盒被應用于臨床,并為確診新冠肺炎提供病原學證據(jù) 。那么,應用試劑盒進行核酸檢測,究竟是怎樣的一個過程呢?
首先,檢測人員需要在試劑的幫助下,將樣本中的核酸提取出來 。再把已經(jīng)分離出來的核酸加到核酸擴增試劑中,然后將其放到核酸擴增儀內,一般兩個小時內就會有結果 。
事實上,在操作步驟中,擴增是很重要的一環(huán) 。擴增的意義在于能讓微量的遺傳信息成指數(shù)增加 。只要樣本中有核酸基因片段,就能用PCR法加以放大,從而更清晰地與病毒全基因組序列實現(xiàn)比對 。
實時熒光逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法已在臨床實驗室應用多年,檢測體系成熟,具有特異性強、靈敏度高、檢測周期短和可定量檢測的優(yōu)點,而且還能對病毒感染程度和治療效果進行動態(tài)監(jiān)測 。
中日友好醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學科主任醫(yī)師陳欣在采訪人員采訪中介紹道:核酸檢測十分敏感,只要在被檢者的分泌物樣本中找到一部分病毒的核酸,就可以通過RT-PCR擴增的方式,整合成序列 。
"雖然不確定核酸是否來自于活病毒,但對于有呼吸道感染癥狀的患者或疑似患者來說,如果其咽拭子有這種核酸,一般認為來源于活病毒的一部分,間接證實其體內存在著病毒的繁殖和感染 。" 陳欣告訴采訪人員 。
核酸檢測容易出現(xiàn)"假陰性"
雖然核酸檢測有靈敏度高、檢測周期短等優(yōu)點,但也存在著一定的弊端 。不同于從人體內直接分離出活病毒的方式,核酸檢測采用的是一種間接的方式,有可能造成假陰性 。
因為試劑盒存在最低檢測限的問題,所以只有當采到的樣本中,病毒的含量達到一定程度時才能檢測出來 。少數(shù)情況下,可能康復者并未康復,但由于樣本中病毒載量低,故康復者核酸檢測的結果呈陰性,也就是我們常說的"假陰性" 。
因此,在《新型冠狀病毒肺炎診療標準(試行第七版)》中,出院標準之一為連續(xù)兩次痰、鼻咽拭子等呼吸道標本核酸檢測陰性(釆樣時間至少間隔24小時) 。
而之所以選取呼吸道標本進行核酸檢測,是因為新冠肺炎屬于呼吸道傳染病,故而優(yōu)先考慮從呼吸道的分泌物中取得標本 。呼吸道又分為上呼吸道和下呼吸道,前者主要包括鼻、咽、喉;后者主要包括氣管、主支氣管及肺內各級支氣管 。

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