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朗伯比爾定律的公式及符號(hào)含義 朗伯比爾定律( 四 )

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4.1.2多組分分析使用紫外-可見分光光度法，通常可以在不分離的情況下測(cè)定同一樣品溶液中的多種組分 。假設(shè)溶液中同時(shí)存在兩個(gè)組分X和Y，它們的吸收光譜一般有重疊和不重疊的情況 。不重疊的確定成分不會(huì)相互干擾 。如果吸收光譜重疊，則分別在λ1和λ2處測(cè)量吸光度A1和A2 。從吸光度值的相加獲得聯(lián)立方程，并且通過解聯(lián)立方程獲得濃度值 。
4.2定量方法紫外-可見分光光度法分析的定量基礎(chǔ)是光吸收定律，但具體操作方法有很多 。
4.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線法，即工作曲線法，適用于大量重復(fù)樣品分析，是工廠控制分析中應(yīng)用最廣泛的方法 。根據(jù)光吸收定律，ε是有色化合物的常數(shù)值 。如果光程L也是固定的，那么吸光度A與溶液的濃度C成正比，也就是說吸光度A與濃度C成線性關(guān)系，配制一系列適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，顯色后測(cè)定其吸光度，將吸光度A對(duì)濃度C作圖，得到工作曲線 。
直接比較法
直接比較法的本質(zhì)也是工作曲線法，是一種簡(jiǎn)化的工作曲線法 。將一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品與已知濃度的被測(cè)組分cs匹配，測(cè)得其吸光度為，然后在相同條件下測(cè)得未知樣品的吸光度為Ax，計(jì)算出未知樣品的濃度cx 。
As=εcsL
Ax=εcxL
因?yàn)槿芤盒再|(zhì)相同，比色皿厚度相同，所以/Ax=cs/cx公式:
cs——已知被測(cè)組分的濃度，mol/L；
Cx-未知樣品的濃度，mol/L；
被測(cè)成分的已知吸光度；
Ax-未知樣品的吸光度 。直接比較法簡(jiǎn)化了繪制工作曲線的步驟，適用于單個(gè)樣品的測(cè)定 。操作時(shí)，應(yīng)注意配制的標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度要接近被測(cè)樣品的濃度，這樣可以減少測(cè)量誤差 。
4.2.3標(biāo)準(zhǔn)加入法標(biāo)準(zhǔn)加入法是工作曲線的特殊應(yīng)用 。選擇合適的顯色條件，先以濃度cx為Ax測(cè)定未知樣品的吸光度，然后在未知樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)樣品，配制成濃度cx+δ C1，CX+δ C2 ……的系列樣品，顯色后，測(cè)定吸光度為A1，A2……最后在坐標(biāo)紙上，以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度C為橫坐標(biāo)，分別畫出δ C1和δ C2對(duì)應(yīng)的A1和δ C2 。應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)加入法時(shí)，應(yīng)注意加入的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度要合適，以使繪制的曲線保持在合適的角度 。濃度過大或過小都會(huì)造成測(cè)量誤差 。該方法操作麻煩，不適用于系列樣品分析，但適用于成分復(fù)雜、干擾因素多的樣品，因?yàn)樗梢韵尘暗挠绊?。
4.3紫外-可見分光光度計(jì)的使用注意事項(xiàng)4.3.1保護(hù)光源 。光源燈有一定的壽命 。儀器不工作時(shí)不要開燈 。如果間歇時(shí)間很短，不要關(guān)燈 。機(jī)器停止后，待燈冷卻后重新啟動(dòng)，預(yù)熱15分鐘 。當(dāng)燈泡發(fā)黑或亮度明顯減弱或不穩(wěn)定時(shí)，要及時(shí)更換 。紫外線照射后形成結(jié)痕可以用無水乙醇去除 。
4.3.2保證合適的工作環(huán)境溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素 。不適當(dāng)?shù)臏囟群蜐穸葧?huì)引起機(jī)械部件的腐蝕，降低金屬鏡面的光潔度，引起儀器機(jī)械部件的誤差或性能下降；造成光柵、反射鏡、聚焦鏡等光學(xué)元件鋁膜腐蝕，造成光能不足、雜散光、噪聲等 。甚至使儀器停止工作，從而影響儀器的壽命 。維護(hù)期間，應(yīng)定期校正溫度和濕度 。實(shí)驗(yàn)室，尤其是位于中國南方的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)具有四季恒溫的儀器室，配備恒溫設(shè)備 。環(huán)境中的灰塵和腐蝕性氣體也會(huì)影響機(jī)械系統(tǒng)的靈活性，降低各種限位開關(guān)、按鍵和光電耦合器的可靠性，也是光學(xué)元件鋁膜腐蝕的原因之一 。所以一定要定期清洗，保證儀器內(nèi)的環(huán)境和衛(wèi)生條件，防止灰塵 。
4.3.3儀器經(jīng)過一定時(shí)間的定期除塵和校準(zhǔn)后，內(nèi)部會(huì)積累一定量的灰塵 。最好由維修工程師或在工程師的指導(dǎo)下定期打開儀表蓋進(jìn)行除塵 。同時(shí)重新緊固各發(fā)熱元件的散熱器，清潔光學(xué)箱的密封窗口，必要時(shí)校準(zhǔn)光路，清潔潤滑機(jī)械部分，最后恢復(fù)原狀，然后做一些必要的測(cè)試、校準(zhǔn)和記錄 。

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