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朗伯比爾定律的公式及符號(hào)含義 朗伯比爾定律

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分光光度法是指利用分光光度計(jì)的分析方法，具有靈敏、準(zhǔn)確、快速、選擇性好的特點(diǎn) 。通常被測(cè)樣品溶液濃度下限可達(dá)10-6~10-5mol/L，適用于食品中微量成分(如肉制品中的亞硫酸鹽、糖果中的二氧化硫等)
分光光度法是指利用分光光度計(jì)的分析方法，具有靈敏、準(zhǔn)確、快速、選擇性好的特點(diǎn) 。
通常被測(cè)樣品溶液濃度下限可達(dá)10-6~10-5mol/L，適用于食品中微量成分(如肉制品中的亞硫酸鹽、糖果中的二氧化硫等)的測(cè)定 。).
一.原則
1.1物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收當(dāng)光束照射到物質(zhì)上時(shí)，光與物質(zhì)相互作用，產(chǎn)生反射、散射、吸收或透射 。如果被照射的溶液是均勻的，光的散射可以忽略 。1.1.1溶液顏色的產(chǎn)生當(dāng)一束白光通過有色溶液時(shí)，一部分波長(zhǎng)的光被溶液吸收，另一部分通過溶液 。透射或反射的光線刺激人眼使人感受到顏色的存在 。人能感覺到的光定義為可見光 。在可見光區(qū)，不同波長(zhǎng)的光呈現(xiàn)不同的顏色，因此溶液的顏色由透射光的波長(zhǎng)決定 。透射的光和吸收的光可以形成白光，所以叫做互補(bǔ)色，兩種顏色是互補(bǔ)色 。
1.1.2光吸收的本質(zhì)當(dāng)一束光照射物質(zhì)或其溶液時(shí)，組成物質(zhì)的分子、原子或離子與光子“碰撞”，光子的能量轉(zhuǎn)移到分子、原子或離子上 。正是這些粒子從最低能態(tài)(基態(tài))躍遷到較高能態(tài)(激發(fā)態(tài)) 。這種作用叫做物質(zhì)對(duì)光的吸收 。受激粒子在大約10-8s后返回基態(tài)，并以熱或熒光的形式釋放能量 。分子、原子或離子具有不連續(xù)的量子化能級(jí)，只有當(dāng)被照射光子的能量hυ等于被照射物質(zhì)粒子基態(tài)和激發(fā)態(tài)的能量之差時(shí)，才能發(fā)生吸收 。不同的物質(zhì)粒子由于結(jié)構(gòu)不同，量子化能級(jí)不同，基態(tài)和激發(fā)態(tài)的能量差也不同 。所以物質(zhì)對(duì)光的吸收是有選擇性的 。
1.1.3吸收曲線吸收曲線又稱吸收光譜，描述了一種物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光的吸收能力 。不同波長(zhǎng)的光透過固定濃度和厚度的有色溶液，測(cè)量有色溶液在每個(gè)波長(zhǎng)的吸收程度(即吸光度) 。然后以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，畫出的曲線就是吸收曲線 。對(duì)于不同濃度的同一物質(zhì)，吸收峰附近的吸光度隨著濃度的增加而增加，但最大吸收波長(zhǎng)不變 。如果在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度，則靈敏度最高 。因此，吸收曲線是分光光度法中選擇測(cè)定波長(zhǎng)的重要依據(jù) 。
1.2光吸收的基本定律，即朗伯-比爾定律:當(dāng)平行單色光通過液層厚度為B的有色溶液時(shí)，溶質(zhì)吸收光能，光強(qiáng)會(huì)減弱 。溶液濃度越大，液層厚度越大，入射光越強(qiáng)，光被吸收越多，光強(qiáng)減弱越明顯 。這一規(guī)律是紫外-可見分光光度法和其他吸收分光光度法定量分析的基礎(chǔ) 。它是通過實(shí)驗(yàn)觀察得到的，不僅適用于溶液，也適用于其他均勻的、非散射的吸光物質(zhì) 。
A=lg(I/I0)=εbc
A-吸光度；
0-入射光強(qiáng)度，CD；
I-透射光強(qiáng)度，CD；
ε-吸收系數(shù)，l/(mol÷cm)；
——液層厚度(光程長(zhǎng)度)，厘米；
c——有色溶液的濃度，mol/L..其物理意義是，當(dāng)一束平行的單色光通過單一均勻無散射的吸光物質(zhì)溶液時(shí)，溶液的吸光度與溶液濃度和液層厚度的乘積成正比 。其中ε是吸光物質(zhì)在特定波長(zhǎng)和溶劑下的特征常數(shù)，數(shù)值上等于吸光物質(zhì)在1cm光路中濃度為1mol/L時(shí)的吸光度 。
ε是吸光物質(zhì)吸光能力的量度 。ε值越大，方法的靈敏度越高 。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算ε時(shí)，經(jīng)常用被測(cè)物質(zhì)的總濃度代替吸光物質(zhì)的濃度，實(shí)際上就是表觀摩爾吸收系數(shù) 。在多組分體系中，如果各種吸光物質(zhì)之間沒有相互作用，則體系的總吸光度等于各組分吸光度之和，即吸光度是相加的 。透射率t是透射光強(qiáng)度I與入射光強(qiáng)度I0的比值，即:

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