（1）母種制作
組織分離法簡(jiǎn)單易行 ， 后代變異小 ， 能保菌株的優(yōu)良特性 ， 它是生產(chǎn)上常用的菌種分離法 。種菇應(yīng)選擇外觀典型 ， 大小適中 ， 菌蓋表面鱗片較少 ， 顏色純白無病蟲害的頭潮菇 ， 采摘種菇應(yīng)在雞腿菇生長(zhǎng)的棒狀后期或梭形前期 。
母種培養(yǎng)基可選擇PDA培養(yǎng)基 ， 也可用如下配方：小麥600克 ， 鮮子實(shí)體100克 ， 葡萄糖20克 ， 蛋白胨3克 ， 磷酸二氫鉀0.5克 ， 磷酸氫二鉀1克 ， 硫酸鎂1克 ， 硫酸鈣1克 ， 瓊脂25克 ， 水1000 毫升 。母種培養(yǎng)基的制作過程及無菌分離技術(shù)同其它食用菌制種技術(shù) ， 不再介紹 。
（2）原種制作
雞腿菇原種制作多采用麥粒種 ， 其配制方法如下：麥粒浸泡24小時(shí)左右 ， 至麥粒露白 ， 用清水沖洗后煮沸20-25分鐘 ， 撈出瀝干水后加1％石膏粉 ， 20％已粉碎的麥稈發(fā)酵料 ， 然后裝瓶 ， 滅菌、無菌接種與培養(yǎng) 。此配方菌絲生長(zhǎng)旺盛 ， 生長(zhǎng)速度快 ， 在25℃環(huán)境下750毫升菌種瓶12~15天可長(zhǎng)滿瓶 。
（3）栽培種的制作
雞腿菇栽培種培養(yǎng)基多用棉殼、麥稈發(fā)酵料配制 。配方如下：麥稈牛糞發(fā)酵料33%、麩皮10 %、棉籽皮50％、玉米粉5％、石灰2% 。先將麥稈粉碎中加牛糞20％-30% ， 加石膏2％ ， 堆積發(fā)酵5-6天 ， 然后加入其它原料 ， 發(fā)酵48小時(shí)即可裝袋滅菌 ， 無菌接種與培養(yǎng) 。此配方比單純用發(fā)酵料及單純用棉籽皮有發(fā)酵快、菌絲壯的優(yōu)點(diǎn) 。
【雞腿菇菌種制作方法】
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