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蛋白質(zhì)的發(fā)現(xiàn)分類 蛋白質(zhì)的提純和分離四步( 三 )

小知識(shí)蛋白


②糖蛋白的非蛋白質(zhì)部分是糖，稱為糖蛋白 。廣泛存在于動(dòng)物、植物、真菌、細(xì)菌和病毒中 。
③脂蛋白蛋白與脂質(zhì)結(jié)合形成脂蛋白 。在脂蛋白中，脂質(zhì)和蛋白質(zhì)通過非共價(jià)鍵結(jié)合 。廣泛分布于細(xì)胞和血液中 。
④色蛋白蛋白與一些色素物質(zhì)結(jié)合形成色蛋白 。非蛋白部分多為血紅素，故又稱血紅素蛋白 。
⑤金屬蛋白是一類直接與金屬結(jié)合的蛋白質(zhì)，如含鐵的鐵蛋白；乙醇脫氫酶含有鋅，黃嘌呤氧化酶含有鉬和鐵 。
⑥磷蛋白分子中含有磷酸基團(tuán)，一般通過酯鍵與蛋白質(zhì)分子中的絲氨酸或蘇氨酸相連 。如酪蛋白和胃蛋白酶，都屬于這類蛋白質(zhì) 。
⒌根據(jù)需求 。
食物中的蛋白質(zhì)必須經(jīng)過胃腸道的消化，分解成氨基酸，才能被人體吸收利用 。人體對蛋白質(zhì)的需要，其實(shí)就是對氨基酸的需要 。吸收的氨基酸只能在數(shù)量和種類上滿足人體的需要，身體才能利用它們合成自己的蛋白質(zhì) 。
(1)必需氨基酸
必需氨基酸是指人體自身不能合成或合成速度不能滿足人體需要，必須從食物中攝取的氨基酸 。對成人來說，有8種氨基酸，包括賴氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、色氨酸和苯丙氨酸 。對嬰兒來說，有9種，多一種組氨酸 。如果體內(nèi)缺乏必需氨基酸，就無法為身體各組織合成足夠的蛋白質(zhì)，其他多余的蛋白質(zhì)也會(huì)被身體的新陳代謝所浪費(fèi)，所以保證必需氨基酸的充足攝入非常重要 。
(2)非必需氨基酸
非必需氨基酸不是指人體不需要這些氨基酸，而是指人體可以自行合成或由其他氨基酸轉(zhuǎn)化而來，不需要直接從食物中攝取 。這些氨基酸包括甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、天冬氨酸、谷氨酸(及其胺)、脯氨酸、精氨酸、組氨酸、酪氨酸和胱氨酸 。一些非必需氨基酸，如胱氨酸和酪氨酸，如果供應(yīng)充足，也可以省去必需氨基酸中蛋氨酸和苯丙氨酸的需要量 。
五、蛋白質(zhì)的分離純化 。
許多蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)和性質(zhì)上有許多相似之處，因此蛋白質(zhì)的分離是一項(xiàng)復(fù)雜的任務(wù) 。蛋白質(zhì)純化的目的是提高產(chǎn)品的純度和收率，同時(shí)保持和提高產(chǎn)品的生物活性 。所以，要想分離純化某種蛋白質(zhì)，首先要選擇富含蛋白質(zhì)的材料 。其次，制備活性蛋白應(yīng)避免蛋白質(zhì)變性 。對于大多數(shù)蛋白質(zhì)來說，純化操作是在0 ~ 4℃的低溫下進(jìn)行的 。同時(shí)也要避免酸堿過多的條件，以及劇烈的攪拌和振蕩 。此外，應(yīng)盡量去除變性蛋白和其他外源蛋白，以提高純度和收率 。
1 。原材料的選擇
選擇適當(dāng)?shù)母缓@種蛋白質(zhì)的食物或其他材料 。
【蛋白質(zhì)的發(fā)現(xiàn)分類 蛋白質(zhì)的提純和分離四步】2 。預(yù)處理和細(xì)胞破碎
在分離純化某種蛋白質(zhì)時(shí)，首先要使蛋白質(zhì)從組織或細(xì)胞中釋放出來，保持其原有的自然狀態(tài)，不喪失其活性 。破碎組織細(xì)胞的常用方法有:
(1)機(jī)械破碎這種方法是利用機(jī)械力的剪切作用來破碎細(xì)胞 。常用的設(shè)備有高速組織搗碎機(jī)、均質(zhì)機(jī)、研缽等 。
(2)滲透破碎法這種方法是在低滲條件下，使細(xì)胞膨脹破碎 。
(3)反復(fù)凍融法生物組織冷凍后，胞內(nèi)液凍結(jié)膨脹，導(dǎo)致細(xì)胞破裂 。這種方法簡單方便，但需要注意的是不適用于對溫度變化敏感的蛋白質(zhì) 。
(4)超聲波法利用超聲波振動(dòng)器，使細(xì)胞膜上的張力不均勻，使細(xì)胞破裂 。
(5)用溶菌酶破壞微生物細(xì)胞等酶法 。
3 。蛋白質(zhì)的提取
蛋白質(zhì)通常通過選擇合適的緩沖溶劑來提取 。用于提取的緩沖液的pH、離子強(qiáng)度、組成和其他條件的選擇應(yīng)取決于待制備的蛋白質(zhì)的性質(zhì) 。白蛋白可以用水提?。磺虻鞍卓捎弥行喳}溶液提?。幻娼羁梢杂孟∷峄蛳A提?。挥眠m當(dāng)濃度的乙醇提取醇溶液中的谷蛋白 。例如在膜蛋白的提取中，表面活性劑(十二烷基磺酸鈉等 。)通常被添加到提取緩沖液中，以破壞膜結(jié)構(gòu)并促進(jìn)蛋白質(zhì)從膜中分離 。在提取過程中，需要保持低溫以減少降解酶的作用 。一般在0℃附近提取 。避免劇烈攪拌等 。，防止蛋白質(zhì)變性 。

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