1、培養(yǎng)基配方：
（1）I號：PDA(馬鈴薯200g+葡萄糖18g+瓊脂18g+水1000m1)；
【種蘑菇自制菌種 蘑菇菌種自制方法】（2）Ⅱ號：PDA+硫酸鎂1.5g+磷酸二氫鉀3g+蛋白胨2g+水1000ml；
（3）Ⅲ號：馬鈴薯100g+干雜木屑100g+葡萄糖20g+瓊脂20g+水1000ml 。
（4）注意：上述配方的培養(yǎng)基經(jīng)高壓20分鐘滅菌消毒后制成試管斜面 ， 3天內(nèi)用完 。
2、制作方法：
通過組織分離技術(shù) ， 將選取的大球蓋菇組織塊接入I號培養(yǎng)基上(或接入需復(fù)壯的保存種) 。在24--28℃條件下經(jīng)10--15天培養(yǎng),菌絲長至試管1/3--1/4時,挑取菌絲擴(kuò)展前端濃密、粗壯的部分轉(zhuǎn)入Ⅱ號或Ⅲ號培養(yǎng)基上 ， 采用兩點(diǎn)接種法 ， 以使菌絲迅速長滿培養(yǎng)基表面(一般15--20天)提高菌絲的質(zhì)量 。經(jīng)Ⅱ號、Ⅲ號復(fù)壯培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲表現(xiàn)為濃白、粗壯、生命力強(qiáng) ， 以利原種菌絲的生長 ， 縮短原種培養(yǎng)時間 ， 提高成品率 。
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