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如何進(jìn)行細(xì)菌濃度的測(cè)定


如何進(jìn)行細(xì)菌濃度的測(cè)定


進(jìn)行細(xì)菌濃度的測(cè)定的方法有:
1、取已經(jīng)培養(yǎng)好的細(xì)菌瓊脂平板,加入2ml新鮮的生理鹽水,用L棒輕輕將菌落刮下,收集在1.5mlEP管中 。
2、取10μl菌液涂布在載玻片上,干燥固定后進(jìn)行格蘭染色鑒定 。
3、將EP管置于離心機(jī),5000RPM離心5min 。
4、棄上清,取1ml完全無抗1640培養(yǎng)基重懸細(xì)菌;取新的1.5mlEP管,加入950μl生理鹽水,及50μl菌液 , 混勻(稀釋20倍) 。
【如何進(jìn)行細(xì)菌濃度的測(cè)定】5、在分光光度計(jì)上測(cè)定OD值:以生理鹽水作為空白對(duì)照調(diào)零 , 測(cè)定稀釋20倍的菌液的吸光度,若OD值在0.3-0.7的范圍內(nèi),則按照1OD=1.0×109CFU/ml計(jì)算原始菌液濃度 。若OD值大于0.7且小于1 , 則取原始菌液進(jìn)行40倍稀釋后測(cè)定吸光度值 。若OD值小于0.3,則取原始菌液進(jìn)行10倍或5倍稀釋后測(cè)定吸光度值 。務(wù)必將OD值調(diào)整到0.3-0.7的范圍內(nèi) 。

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