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保種！農(nóng)業(yè)農(nóng)村部印發(fā)“國家級地方豬遺傳材料采集保存工作實(shí)施方( 三 )

云知道農(nóng)業(yè)農(nóng)村部


(二)供體請求
符合品種特性、特征;三代以內(nèi)無血緣關(guān)系，系譜清晰;健康、必檢疾病為陰性 。
(三)細(xì)管標(biāo)記及包裝
應(yīng)在細(xì)管上標(biāo)明保種場(保護(hù)區(qū))建設(shè)單位代碼、品種代碼、供體號和生產(chǎn)日期 。保種場(保護(hù)區(qū))建設(shè)單位代碼用漢語拼音大寫首字母表示，品種代碼為該品種漢字的漢語拼音大寫首字母，生產(chǎn)日期按年月日次序羅列，年月日各占二位數(shù)字，年度的后兩位數(shù)組成年的二位數(shù)，月、日不夠二位的，月、日前分辭加“0”補(bǔ)充為二位數(shù) 。
CQXK為重慶畜牧科學(xué)院代碼，RCZ為榮昌豬的品種代碼，11003為該公豬號，120525為2012年5月25日的生產(chǎn)日期 。
細(xì)管裝入指形管，指形管上標(biāo)記供體豬號、寒凍精液數(shù)量及生產(chǎn)日期 。再用滅菌紗布袋將裝有寒凍精液的指形管包裝起來，一個(gè)滅菌紗布袋裝一頭豬的寒凍精液，并有標(biāo)簽附在紗布袋上，放入液氮中保存 。紗布袋標(biāo)簽請求標(biāo)記如下內(nèi)容：袋號、品種、供體豬號、寒凍精液數(shù)量、解凍后精子的活力 。
(四)質(zhì)量檢測
【保種！農(nóng)業(yè)農(nóng)村部印發(fā)“國家級地方豬遺傳材料采集保存工作實(shí)施方】1. 抽樣數(shù)量及請求
抽取總樣本量的2%進(jìn)行質(zhì)量檢測，檢測合格率請求達(dá)到80%以上 。
2. 指標(biāo)
(1)0.25mL劑型寒凍精液
每支劑量≥0.18mL;活力≥30%;精子畸形率≤20%;每支前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子數(shù)≥2.5×107;每支細(xì)菌菌落數(shù)≤800個(gè) 。
(2)0.5mL劑型寒凍精液
每支劑量≥0.40mL;活力≥30%;精子畸形率≤20%;每支前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子數(shù)≥5.0×107;每支細(xì)菌菌落數(shù)≤1600個(gè) 。
二、體細(xì)胞寒凍保存
(一)數(shù)量請求
每個(gè)保種場(保護(hù)區(qū))的每個(gè)品種公豬不少于12頭，涵蓋所有家系;母豬不少于25頭，每個(gè)個(gè)體體外培育原代或第1代細(xì)胞6管，每管1mL，用1.5mL或2.0mL凍存管包裝，細(xì)胞密度為1×105/mL以上 。
(二)供體請求
符合品種特性、特征;三代以內(nèi)無血緣關(guān)系，系譜清晰;健康、必檢疾病為陰性 。
(三)寒凍管標(biāo)記及包裝
凍存管上標(biāo)記編號、品種漢語名稱或代碼，細(xì)胞名稱或代碼、性辭、培育代數(shù)、凍存日期 。用滅菌紗布袋將凍存管包裝起來，一個(gè)滅菌紗布袋裝2-3頭豬的凍存管，并有標(biāo)簽附在紗布袋上，放入液氮中保存 。紗布袋標(biāo)簽標(biāo)伎捶種、供體豬號、凍存管數(shù)量 。
(四)質(zhì)量檢測
1.抽樣數(shù)量 。抽取總樣本量的4%進(jìn)行質(zhì)量檢測，檢測合格率請求達(dá)到70%以上 。
2.指標(biāo) 。細(xì)胞密度不低于1×105個(gè)/mL;細(xì)胞活力80%以上;支原體檢測為陰性 。
三、耳組織及基因組DNA樣寒凍保存
每個(gè)保種場(保護(hù)區(qū))每個(gè)品種采樣數(shù)量40頭(對所有公豬家系所有進(jìn)行采樣，繁殖公豬、繁殖母豬各1頭，和后備公豬和后備母豬各1頭，且后備豬避免全同胞關(guān)系) 。每個(gè)品種每個(gè)個(gè)體采集3份耳樣，每份耳組織樣不少于2克(用2 ml凍存管保存)，凍存管上詳細(xì)標(biāo)注品種、耳號、性辭、采樣日期、場地等關(guān)鍵信息 。耳樣采集后立即置于液氮中保存 。
四、腸道菌群寒凍保存
(一)數(shù)量請求
每個(gè)保種場(保護(hù)區(qū))每個(gè)品種公豬不少于10頭，母豬不少于50頭，每頭豬采集糞便樣本2份(每份2克) 。
(二)供體請求
60日齡后備豬，符合品種特性、特征;三代以內(nèi)無血緣關(guān)系，系譜清晰;近一個(gè)月沒有使用抗生素、食欲正常、體重達(dá)該品種60日齡階段標(biāo)準(zhǔn) 。
(三)凍存管標(biāo)記及包裝
凍存管上標(biāo)記編號、品種漢語名稱、性辭、采樣日齡、采樣日期 。
(四)采樣請求和主意
1.采樣請求
(1)每頭豬采集清新糞便樣本2份(每份2克)，其中一份用2.0 mL凍存管包裝后立即投入液氮或-80℃保存，另一份用5.0mL凍存管取1克清新糞便置于3.0 mL 含20%甘油和5%蔗糖的保護(hù)液中，液氮或-80℃保存 。

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