原理：提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oligo或隨機引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA 。再以cDNA為模板進行PCR擴增，而獲得目的基因或檢測基因表達 。過程：在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下以dNTP為底物，RNA為模板，tRNA為引物 。
按5′→3′方向，合成一條與RNA模板互補的DNA單鏈 。然后它與RNA模板形成RNA DNA雜交體，隨后又在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，水解掉RNA鏈，再以此DNA為模板合成第二條DNA 。逆轉(zhuǎn)錄過程是病毒的復(fù)制形式之一，如RNA病毒中的逆轉(zhuǎn)錄病毒，DNA病毒中的嗜肝DNA病毒和花椰菜花葉病病毒的復(fù)制均需要經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄 。
逆轉(zhuǎn)錄過程在真核細胞中也同樣存在，例如逆轉(zhuǎn)座子和端粒DNA的延長均存在逆轉(zhuǎn)錄過程，需逆轉(zhuǎn)錄酶的催化 。逆轉(zhuǎn)錄過程的揭示是分子生物學(xué)研究中的重大發(fā)現(xiàn)，是對中心法則的重要修正和補充 。
【逆轉(zhuǎn)錄的原理及主要過程 逆轉(zhuǎn)錄的基本過程】人們通過體外模擬該過程，以樣本中提取的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，合成出互補的cDNA，構(gòu)建cDNA文庫，并從中篩選特異的目的基因 。該方法已成為基因工程技術(shù)中最常用的獲得目的基因的策略之一 。
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