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瓊脂糖凝膠電泳原理

1、瓊脂糖凝膠電泳原理:瓊脂糖凝膠具絡(luò),物質(zhì)分子通過時(shí)到阻力,大分子物質(zhì)在涌動(dòng)時(shí)受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力 。但由于其孔徑相比于蛋白質(zhì)太大,對大多數(shù)蛋白質(zhì)來說其分子篩效應(yīng)微不足道,現(xiàn)廣泛應(yīng)用于核酸的研究中 。瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法 。其分析原理與其他支持物電泳最主要區(qū)別是:它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用 。
【瓊脂糖凝膠電泳原理】2、核酸是兩性電解質(zhì),其等電點(diǎn)為pH2-2.5,在常規(guī)的電泳緩沖液中(pH約8.5),核酸分子帶負(fù)電荷,在電場中向正極移動(dòng) 。核酸分子在瓊脂糖凝膠中泳動(dòng)時(shí),具有電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng),但主要為分子篩效應(yīng) 。線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數(shù)成反比,分子越大則所受阻力越大,也越難于在凝膠孔隙中移動(dòng),因而遷移得越慢 。

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