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核酸檢測(cè)怎樣是健康的

核酸檢測(cè)是怎樣檢測(cè)的
眾所周知,新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是一種烈性呼吸道傳染病,其病原體為新型冠狀病毒 。若想證實(shí)已出現(xiàn)的感染癥狀是由本病毒所引起,最準(zhǔn)確的方法是從患者體內(nèi)分離出活病毒,并進(jìn)行病毒培養(yǎng) 。
然而,此方法并不適合大面積應(yīng)用,在此次疑似病例的確診工作中,也并不適用 。這是因?yàn)椴《九囵B(yǎng)所需時(shí)間較長(zhǎng),需要的場(chǎng)所條件也很高(P3級(jí)實(shí)驗(yàn)室),時(shí)效性遠(yuǎn)遠(yuǎn)跟不上臨床需要 。
而核酸檢測(cè)作為病原學(xué)的檢測(cè)手段之一,效率很高,一般情況下幾個(gè)小時(shí)就可以知道結(jié)果 。因此,在此次疫情中,臨床上取得病原學(xué)證據(jù)的主要方式并不是病毒培養(yǎng),而是核酸檢測(cè) 。
核酸是遺傳信息載體,是對(duì)DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)的統(tǒng)稱(chēng) 。病毒則主要由遺傳物質(zhì)和蛋白質(zhì)組成 。而新型冠狀病毒正是一種RNA病毒,其遺傳物質(zhì)是單鏈RNA 。核酸檢測(cè)的原理,正是檢測(cè)在被測(cè)者的咽拭子等樣本中,是否存在病毒的RNA 。如果存在,說(shuō)明被病毒感染 。那么,我們是否已經(jīng)獲悉了病毒的RNA呢?
在武漢疫情初期,中國(guó)疾病預(yù)防控制中心應(yīng)用宏基因組學(xué)技術(shù),在短時(shí)間內(nèi)完成該病毒的鑒定,并獲取了全基因組序列 。在病毒全基因組序列公布后,實(shí)時(shí)熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)試劑被快速研發(fā) 。
隨后,核酸檢測(cè)試劑盒被應(yīng)用于臨床,并為確診新冠肺炎提供病原學(xué)證據(jù) 。那么,應(yīng)用試劑盒進(jìn)行核酸檢測(cè),究竟是怎樣的一個(gè)過(guò)程呢?
首先,檢測(cè)人員需要在試劑的幫助下,將樣本中的核酸提取出來(lái) 。再把已經(jīng)分離出來(lái)的核酸加到核酸擴(kuò)增試劑中,然后將其放到核酸擴(kuò)增儀內(nèi),一般兩個(gè)小時(shí)內(nèi)就會(huì)有結(jié)果 。
事實(shí)上,在操作步驟中,擴(kuò)增是很重要的一環(huán) 。擴(kuò)增的意義在于能讓微量的遺傳信息成指數(shù)增加 。只要樣本中有核酸基因片段,就能用PCR法加以放大,從而更清晰地與病毒全基因組序列實(shí)現(xiàn)比對(duì) 。
實(shí)時(shí)熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法已在臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用多年,檢測(cè)體系成熟,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、檢測(cè)周期短和可定量檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn),而且還能對(duì)病毒感染程度和治療效果進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè) 。
中日友好醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科主任醫(yī)師陳欣在采訪人員采訪中介紹道:核酸檢測(cè)十分敏感,只要在被檢者的分泌物樣本中找到一部分病毒的核酸,就可以通過(guò)RT-PCR擴(kuò)增的方式,整合成序列 。
"雖然不確定核酸是否來(lái)自于活病毒,但對(duì)于有呼吸道感染癥狀的患者或疑似患者來(lái)說(shuō),如果其咽拭子有這種核酸,一般認(rèn)為來(lái)源于活病毒的一部分,間接證實(shí)其體內(nèi)存在著病毒的繁殖和感染 。" 陳欣告訴采訪人員 。
核酸檢測(cè)容易出現(xiàn)"假陰性"
【核酸檢測(cè)怎樣是健康的】雖然核酸檢測(cè)有靈敏度高、檢測(cè)周期短等優(yōu)點(diǎn),但也存在著一定的弊端 。不同于從人體內(nèi)直接分離出活病毒的方式,核酸檢測(cè)采用的是一種間接的方式,有可能造成假陰性 。
因?yàn)樵噭┖写嬖谧畹蜋z測(cè)限的問(wèn)題,所以只有當(dāng)采到的樣本中,病毒的含量達(dá)到一定程度時(shí)才能檢測(cè)出來(lái) 。少數(shù)情況下,可能康復(fù)者并未康復(fù),但由于樣本中病毒載量低,故康復(fù)者核酸檢測(cè)的結(jié)果呈陰性,也就是我們常說(shuō)的"假陰性" 。
因此,在《新型冠狀病毒肺炎診療標(biāo)準(zhǔn)(試行第七版)》中,出院標(biāo)準(zhǔn)之一為連續(xù)兩次痰、鼻咽拭子等呼吸道標(biāo)本核酸檢測(cè)陰性(釆樣時(shí)間至少間隔24小時(shí)) 。
而之所以選取呼吸道標(biāo)本進(jìn)行核酸檢測(cè),是因?yàn)樾鹿诜窝讓儆诤粑纻魅静?,故而?yōu)先考慮從呼吸道的分泌物中取得標(biāo)本 。呼吸道又分為上呼吸道和下呼吸道,前者主要包括鼻、咽、喉;后者主要包括氣管、主支氣管及肺內(nèi)各級(jí)支氣管 。

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