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如何進行pcr引物設計


如何進行pcr引物設計


原理:
PCR引物設計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段 , 使其能有效地擴增模板DNA序列 , 引物的優(yōu)劣直接關系到PCR的特異性與成功與否 。
【如何進行pcr引物設計】原則:
引物應用核酸系列保守區(qū)內設計并具有特異性 。產物不能形成二級結構 。引物長度一般在15到30堿基之間 。G加C含量在百分之40到60之間 。堿基要隨機分布 。引物自身不能有連續(xù)4個堿基的互補 。引物之間不能有連續(xù)4個堿基的互補 。引物5撇端可以修飾 。引物3撇端不可修飾 。引物3撇端要避開密碼子的第3位 。

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