此系統(tǒng)的工作原理是crRNA（CRISPR-derivedRNA）通過堿基配對與tracrRNA（trans-activatingRNA）結(jié)合形成tracrRNA/crRNA復(fù)合物，此復(fù)合物引導(dǎo)核酸酶Cas9蛋白在與crRNA配對的序列靶位點(diǎn)剪切雙鏈DNA 。而通過人工設(shè)計(jì)這兩種RNA，可以改造形成具有引導(dǎo)作用的sgRNA（singleguideRNA） ， 足以引導(dǎo)Cas9對DNA的定點(diǎn)切割 。
【crisprcas9的原理 crisprcas9的原理是基因突變還是基因重組】作為一種RNA導(dǎo)向的dsDNA結(jié)合蛋白，Cas9效應(yīng)物核酸酶是已知的第一個(gè)統(tǒng)一因子（unifyingfactor），能夠共定位RNA、DNA和蛋白，從而擁有巨大的改造潛力 。將蛋白與無核酸酶的Cas9（Cas9nuclease-null）融合，并表達(dá)適當(dāng)?shù)膕gRNA ， 可靶定任何dsDNA序列，而sgRNA的末端可連接到目標(biāo)DNA ， 不影響Cas9的結(jié)合 。因此，Cas9能在任何dsDNA序列處帶來任何融合蛋白及RNA ， 這為生物體的研究和改造帶來巨大潛力 。
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