基因表達(dá)載體構(gòu)建步驟_生活經(jīng)驗(yàn)

操作步驟如下：
1、用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使質(zhì)粒出現(xiàn)缺口，露出黏性末端；
2、再用同一種限制酶切斷目的基因，使其產(chǎn)生相同的黏性末端；
3、將切下的目的基因的片段插入質(zhì)粒的切口處；
4、再使堿基互補(bǔ)配對結(jié)合，兩個黏性末端吻合在一起，堿基之間形成氫鍵；
【基因表達(dá)載體構(gòu)建步驟】5、再加入適量的DNA連接酶，催化兩條DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵，從而將相鄰的脫氧核糖核酸連接起來，形成一個重組DNA分子。