3.模板PCR擴增：既然已經(jīng)提取了病毒RNA直接檢測不就可以了嗎，為什么還要進行這一步呢？PCR擴增的目的是將微量的RNA經(jīng)過2的N次方進行放大，這樣更便于我們檢測目標RNA 。但是，PCR擴增的模板必須是DNA，所以要想檢測新冠肺炎病毒RNA，必須先將其反轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄）為cDNA，然后加入試劑材料讓其以2的N次方進行復(fù)制 。為了實時動態(tài)的檢測這一過程，檢測者可以在反應(yīng)體系中加入熒光探針或者熒光染料，隨著DNA每復(fù)制一次，熒光強度也會隨之增加，我們通過檢測熒光強度就可以推算出原始RNA的濃度了 。這就是核酸檢測的核心技術(shù)實時熒光定量PCR 。
（遺傳學(xué)中心法則）
4.核酸檢測結(jié)果的解讀：熒光定量PCR中一個重要的概念是Ct值，即熒光值達到閾值時候的PCR循環(huán)次數(shù)，跟初始模板的量呈反比，即Ct值越大病毒的含量就越少，Ct值越小病毒的含量就越大 。與模板起始拷貝數(shù)的對數(shù)存在線性關(guān)系 。我們利用已知起始拷貝數(shù)的標準樣品就可以描述出標準曲線y=aX+b，y代表Ct值，X為起始拷貝數(shù)的對數(shù)，a、b為常數(shù) 。這樣我們只要測出檢測樣本的Ct值，帶入曲線就可以算出病毒的量了 。同樣的標本進行2次以上的檢測，最后判斷檢測結(jié)果是陽性還是陰性 。
PCR中Ct值的確定
【核酸檢測ct值怎么查】在大多數(shù)有癥狀的COVID-19感染者中，鼻咽拭子中的病毒RNA在癥狀出現(xiàn)的第一天就可以檢測到，并在癥狀出現(xiàn)的第一周內(nèi)達到高峰 。臨床檢測時Ct值小于40為PCR陽性 。這種陽性結(jié)果從第3周開始下降，隨后消失 。然而，重癥住院患者的Ct值低于輕癥患者的Ct值，并且PCR陽性可持續(xù)到發(fā)病后3周，而大多數(shù)輕癥患者會產(chǎn)生陰性結(jié)果，PCR陽性結(jié)果只反映病毒RNA的存在，并不一定表示存在活的肺炎病毒 。在某些情況下，即使在第一次PCR檢測陽性的6周后，RT-PCR仍能檢測到病毒RNA 。少數(shù)病例在24小時內(nèi)連續(xù)兩次PCR檢測陰性后也呈陽性 。這些檢測結(jié)果的不確定性，使得疾病控制和預(yù)防中心（CDC）利用“基于癥狀的策略”來判斷新冠肺炎的傳染性，如果“在康復(fù)后至少3天（72小時）未出現(xiàn)發(fā)熱且沒有使用退燒藥物，這才被被定義為退燒，醫(yī)護人員才可以回到工作崗位 。
推薦閱讀
- 核酸檢測ct值60代表什么
- 黃碼做一次核酸變綠碼可以了嗎
- 做了核酸沒拿到結(jié)果可以上飛機嗎
- 核酸做了但是沒出來能坐飛機嗎
- 核酸結(jié)果沒出坐不了飛機怎么辦
- 下了飛機沒有做核酸檢測怎么辦
- 值得一看的韓劇推薦 值得一看的韓劇有哪些
- 在火車上核酸到期了怎么辦
- 火車站檢測核酸會顯示在手機上嗎
- 下火車還需要核酸檢測報告嗎