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杏鮑菇工廠1、菌株恢復培養:用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養基,滴入安瓿管內,輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀 。 吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養基試管中,并在建議的條件下培養 。
2、傳代保存法:培養基的濃度不宜過高,營養成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低 。 培養溫度通常以稍低于最適生長溫度為好 。 若為產酸菌種,則應在培養基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
3、① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜 。 保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑 。 此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的 。
4、一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等 。 碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成 。 一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成 。 放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天 。
5、霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基 。 這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子 。 霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天 。
6、搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐 。 種子培養基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長 。 原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方 。
7、種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備 。 孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵 。 如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵 。 同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵 。
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